ANALISIS DE LA RESISTENCIA OSMOTICA DE GLOBULOS ROJOS HUMANOS INCUBADOS CON ANTICUERPOS MONOCLONALES ANTI-GPA

Authors

  • N.G. de Isla Mécanique et Ingénierie Cellulaire et Tissulaire - UMR CNRS 7563 et IFR 111 Bioingenierie
  • J.R. Valverde Universidad Nacional de Rosario - CONICET
  • R.J. Rasia Universidad Nacional de Rosario - CONICET
  • J.F. Stoltz Mécanique et Ingénierie Cellulaire et Tissulaire - UMR CNRS 7563 et IFR 111 Bioingenierie
  • B.D. Riquelme Universidad Nacional de Rosario - CONICET

Abstract

La glicoforina A (GPA) es la sialoglicoproteína predominante en la superficie de los glóbulos rojos humanos (GR). En estado nativo, la GPA no interactúa significativamente con el citoesqueleto de la membrana del glóbulo rojo aunque se ha observado que la unión de anticuerpos específicos puede producir una alteración en las propiedades mecánicas de la membrana. Para evaluar este efecto se utilizó un Fragilímetro. Este instrumento permite determinar la resistencia osmótica de la membrana de los glóbulos rojos (GR) por medio de la medida de la extinción de un haz láser proyectado a través de una suspensión de GR. Esta suspensión está sujeta, por difusión, a una variación continua de salinidad desde un equilibrio isotónico (154 mM de NaCl) a uno hipotónico (25 mM de NaCl). La variación de la presión osmótica induce sobre los GR una lisis progresiva, la cual conduce a un cambio de la intensidad de la luz transmitida. Las determinaciones se realizaron con muestras de sangre de dadores sanos, incubadas con distintas concentraciones de un anticuerpo monoclonal anti-GPA. La determinación de los valores de hemólisis inicial, 50% y total permiten la evaluación de la fragilidad de la célula a través de su resistencia osmótica membranal. Nuestros resultados muestran un aumento de la resistencia osmótica a medida que aumenta la cantidad de anticuerpo incorporado durante la incubación. Esto podría deberse a que la unión de los anticuerpos específicos induce un cambio conformacional en el dominio citoplásmico, que resulta en su asociación aumentada con el citoesqueleto de los GR, disminuyendo en consecuencia, la deformabilidad de su membrana.

Author Biographies

N.G. de Isla, Mécanique et Ingénierie Cellulaire et Tissulaire - UMR CNRS 7563 et IFR 111 Bioingenierie

Facultad de Medicina, Universidad Henry Poincaré Nancy 1, Vandoeuvre-les-Nancy, Francia

J.R. Valverde, Universidad Nacional de Rosario - CONICET

Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas

Instituto de Física Rosario (IFIR)

R.J. Rasia, Universidad Nacional de Rosario - CONICET

Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas

Instituto de Física Rosario (IFIR)

J.F. Stoltz, Mécanique et Ingénierie Cellulaire et Tissulaire - UMR CNRS 7563 et IFR 111 Bioingenierie

Facultad de Medicina, Universidad Henry Poincaré Nancy 1, Vandoeuvre-les-Nancy, Francia

B.D. Riquelme, Universidad Nacional de Rosario - CONICET

Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas

Instituto de Física Rosario (IFIR)

Published

2013-04-18